Результаты экспериментальных исследований посвященных изучению терапевтического эффекта трансплантируемых стволовых клеток

Ряд экспериментальных исследований посвящен изучению терапевтического эффекта трансплантируемых стволовых клеток при травме головного мозга. Так, нативные или криоконсервированные клетки NTera-2 вводили в зону механического повреж­дения коры головного мозга крыс. Гистологические исследования, проведенные через 2 и 4 недели, показали высокую выживаемость трансплантированных клеток, а иммуноцитохимические реакции с применением антител МОС-1, специфичных в отношении молекул клеточной адгезии нейронов человека, позволили устано­вить формирование отростков у трансплантированных клеток и их врастание в ткань мозга реципиента. Однако двигательные функции не восстанавливались.

При повреждении спинного мозга в качестве трансплантата использовали эмбриональные стволовые клетки линии ROSA26, которые предварительно подверглись кратковременному воздей­ствию ретиноевой кислоты (клетки вводили в зону контузии спинного мозга че­рез 9 дней после нанесения травмы). Через 2-5 недель в области трансплантации и на расстоянии 8 мм от повреждения находили дифференцированные олигоден­дроциты (43%), астроциты (19%), нейроны (8%). У животных этой группы на­блюдали частичное восстановление координации моторных функций задних ко­нечностей.

Таким образом, результаты экспериментальных исследований показали, что стволовые клетки способны стимулировать регенерацию поврежденных и замещать погибшие ней­роны при острой патологии и нейродегенеративных заболеваниях центральной нервной системы. Их мож­но использовать для генной терапии, применяя клонированные стволовых клеток, экспрессирующие продукты, необходимые для восполнения утраченных вследствие повреж­дения или заболевания нейрогуморальных факторов. Так как стволовые клетки можно генети­чески модифицировать, а также, учитывая их способность к направленной мигра­ции в очаге поражения, предполагается их использование в качестве средства дос­тавки биологически активных веществ, стимулирующих регенеративные процес­сы в центральной нервной системе.

Параллельно с экспериментальными исследованиями ведутся клинические испытания относительно возможности применения стволовых клеток в лечении заболеваний центральной нервной системы. Так, в 2000 г. закончились первые клинические испытания по проверке бе­зопасности пересадки нейробластов, полученных из стволовых клеток тератокарциномы NIera-1 человека. Незрелые клетки размножали многократным пассажированием и полу­чали биомассу 50-100 млн клеток. В части клеток исследовали фенотип и процент примесей, отсутствие контаминации вирусами и бактериями.

Затем из питатель­ной среды убирали LIF и фидерный слой клеток, создавая условия для направ­ленной дифференцировки эмбриональных стволовых клеток в нейроны. Состав смеси, индуцирующий 95%-ю дифференцировку эмбриональных стволовых клеток в нейроны, фирма «БиоЛейтон» (США) не разглашает. Культуру нейробластов пропускали через проточный сортер для удаления незре­лых клеток тератокарциномы. После повторной очистки и определения феноти­па, тщательно подготовленные клетки (10-12 млн нейробластов) с помощью спе­циальной микроканюли и шприца вводили под контролем стереотаксиса и ком­пьютерной томографии в базальное ядро мозга больному через 6 месяцев после гемор­рагического инсульта.