Наиболее опасное осложнение аллогенной трансплантации: введение реципиентам антител против иммунных клеток
Количество клеток собирали, исходя из данных, полученных в опытах на мышах (>2-4-105 кроветворных стволовых клеток) на 1 кг веса, что было достаточно для быстрого приживления. Во всех трех группах удалось собрать и очистить адекватное количество клеток CD34+Thy-1+. Среднее время получения абсолютного количества нейтрофилов (> 500 мл3) составляло 10-12 дней. Лучший результат был при дозе > 8-105 CD34+ Тhу-1+-клеток. Значительно снижалась контаминация мобилизированной периферической крови опухолевыми клетками.
В отобранных образцов крови 37 % Больных раком груди определялись опухолевые клетки, а после очистки количество их составляло 1 на миллион клеток. У больных с лимфомой контаминация снижалась в 3-6 раз, а у больных с миеломой — в 2-4 раза. Клинический результат был наиболее выражен у больных раком груди: средний срок продления жизни составил 1, 4 года, выживаемость — около 60 %.
Концепция терапии аллогенными кроветворными стволовыми клетками отличается от аутотрансплантации кроветворными стволовыми клетками, так как гемопоэгические клетки HLA-совместимого донора не только спасают реципиента от губительного действия облучения в комбинации с химиотерапией, но аллотрансплантация также может давать эффект, называемый «трансплантат — против опухоли». Не подверженный манипуляциям аллогенный костный мозг содержит около 107 CD34-клеток на 1 кг, тогда как мобилизированная периферическая кровь содержит на порядок больше (108) Т-клеток на 1 кг. Содержание Т-клеток в трансплантате имеет важное значение.
Наиболее опасное осложнение аллогенной трансплантации — реакция «трансплантат против хозяина». Как известно, реакция «трансплантант против хозяина» обусловлена тем, что Т-клетки из трансплантата распознают антигены хозяина как чужие и начинают их атаковать. Поэтому аллотрансплантация всегда сопровождается им — муносупрессивной терапией. При попытке истощить трансплантат от Т-клеток наблюдали его редукцию и возникновение других осложнений. В среднем смертность от них достигает 15-20 %.
Для повышения устойчивости пересаженных аллогенных кроветворных стволовых клеток были проведены исследования на мышах. Эти исследования показали, что существует несколько путей для достижения успеха в трансплантации аллогенных кроветворные стволовые клетки:
- Увеличенные дозы кроветворных стволовых клеток для пересадки связаны с большой генетической несовместимостью. Избыток (30-60-кратный) от необходимого количества клеток для спасения смертельно облученных мышей связан с конгенными барьерами, большим и малым комплексом гистосовместимости. Хотя достаточная доза аллогенных кроветворных стволовых клеток для быстрого приживления (<12 дней) трансплантата превышает таковую для сингенных кроветворных стволовых клеток в 2 раза. Следует отметить, что даже при больших дозах кроветворные стволовые клетки, очищенных от Т-клеток, нет реакции «трансплантант против хозяина».
- Второй путь — введение реципиентам антител против иммунных клеток, оставшихся после облучения. В случае различия МНС между донором и реципиентом увеличение количества антител против NK — и Т-клеток заметно снижает иммунологические барьеры. Обнадеживающие результаты, полученные в опытах на мышах, предстоит изучить у человека при использовании антител, а также антител в комплексе с лекарственными средствами, такими как флударабин.
Исследование на мышах результатов трансплантации очищенных кроветворных стволовых клеток и не модифицированного костного мозга показало, что костный мозг содержит популяцию не кроветворных стволовых клеток, которая облегчает приживление трансплантированных аллогенных кроветворные стволовые клетки.
Изучение фенотипа показало, что эта популяция клеток экспрессирует CD8+; она гетерогенна и морфологически экспрессирует также арТ-клеточный рецептор. CD8+ Т-клетки, а также другие СD8+-клетки обладают способностью облегчить приживление трансплантата. При дозированной котрансплантации с CD8+ облегчающими клетками не было выраженной реакции «трансплантант против хозяина». Представляет интерес поиск гомологичной популяции клеток у людей для использования их в трансплантировании очищенных кроветворных стволовых клеток.
В настоящее время в литературе накоплено большое количество данных, полученных в эксперименте, указывающих на применение гемопоэтической трансплантации (пересадка гемопоэтических стволовых клеток) для индукции толерантности к другим пересаженным органам, для лечения аутоиммунных заболеваний. В классических исследованиях Billingham et al. (1953) было показано, что введение аллогенных гемопоэтических клеток новорожденным мышам приводит к приживлению трансплантированных органов у этих реципиентов даже в зрелом возрасте.
Однако клинического применения эти результаты не нашли из-за реакции «трансплантант против хозяина». Очищенные КСЖ не вызывают реакции «трансплантант против хозяина», так как они иммунологически незрелые. Предполагается возможным использовать такие клетки для индукции толерантности к последующей трансплантации органов от этого же донора. Данные предположения подтвердились. Возникшую толерантность связали с негативным отбором Т-клеток.